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SSI果蠅能量代謝監(jiān)測系統(tǒng)
更新時間:2023-02-22
訪問次數(shù):1593
美國Sable公司的多通道果蠅能量代謝測量系統(tǒng)用于精確測量果蠅等昆蟲乃至其它動物呼出二氧化碳量及耗氧量等,并可計算呼吸商、同步化監(jiān)測昆蟲活動及其與能量代謝的關(guān)系,以及與其它行為模塊兼容研究分析睡眠代謝等,廣泛應(yīng)用于果蠅及其它小型昆蟲等動物能量代謝有關(guān)的研究,如遺傳學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、營養(yǎng)學(xué)、腫瘤學(xué)、生物節(jié)律、睡眠代謝、肥胖、二型糖尿病和心血管疾病等生物醫(yī)學(xué)及預(yù)防醫(yī)學(xué)研究實驗等。
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美國Sable公司的多通道果蠅能量代謝測量系統(tǒng)用于精確測量果蠅等昆蟲乃至其它動物呼出二氧化碳量及耗氧量等,并可計算呼吸商、同步化監(jiān)測昆蟲活動及其與能量代謝的關(guān)系,以及與其它行為模塊兼容研究分析睡眠代謝等,廣泛應(yīng)用于果蠅及其它小型昆蟲等動物能量代謝有關(guān)的研究,如遺傳學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、營養(yǎng)學(xué)、腫瘤學(xué)、生物節(jié)律、睡眠代謝、肥胖、二型糖尿病和心血管疾病等生物醫(yī)學(xué)及預(yù)防醫(yī)學(xué)研究實驗,以及其它昆蟲病蟲害防治、昆蟲生理學(xué)、生態(tài)學(xué)等。系統(tǒng)由二氧化碳分析儀、氧氣分析儀、多通道氣路轉(zhuǎn)換器、氣流控制器、數(shù)據(jù)采集器及程序軟件、氣室(呼吸室)等組成。可根據(jù)研究內(nèi)容及經(jīng)費預(yù)算定制8通道(可同時測量7個動物的能量代謝)或更多通道如16通道等觀測系統(tǒng),或選擇同時測量CO2、O2、RQH2O,亦可根據(jù)要求只選擇測量CO2O2的測量系統(tǒng)。

   

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    左圖為模塊式果蠅代謝系統(tǒng)示意圖(來自美國Scripps研究所),右圖為高集成性的MAVEn™果蠅能量代謝系統(tǒng)(來自長春中醫(yī)藥大學(xué))

 

功能特點:

1) 模塊式結(jié)構(gòu),具備強大的系統(tǒng)擴展功能和靈活多樣的實驗配置,是目前世界上果蠅能量代謝研究應(yīng)用、發(fā)表論文最多的儀器系統(tǒng)

2) 標準配置為8通道,可擴展為16通道、24通道或更多通道,應(yīng)用于果蠅等微小昆蟲或其它微小生物能量代謝測量

3) 高靈敏度、高精確度O2/CO2分析儀,是目前世界上可直接對單個果蠅等微小生物在線實時分析(開放式分析)的儀器系統(tǒng)

4) 可通過選配AD-2紅外活動監(jiān)測裝置,實時同步化監(jiān)測果蠅等活動強度(昆蟲活動呼吸室置入紅外活動監(jiān)測儀上,昆蟲的任何活動都會導(dǎo)致反射紅外光強度的細微變化,這種細微的變化經(jīng)檢測器監(jiān)測到并加以放大,轉(zhuǎn)變成電壓信號經(jīng)由數(shù)據(jù)采集器采集和分析,最終反映昆蟲的活動狀況)

5) 可選配溫度調(diào)控系統(tǒng)進行溫度控制,以及FLIC果蠅取食行為監(jiān)測模塊監(jiān)測其飲食行為等。

6) 可以設(shè)置不同的測量方法,如封閉式、開放式、抽樣流動注射等測量技術(shù)

7) 可選配紅外熱成像監(jiān)測模塊,同步監(jiān)測昆蟲體溫

8) 可以其它果蠅行為分析模塊兼容,如DAM果蠅行為監(jiān)測系統(tǒng),進行睡眠等行為與代謝分析。

技術(shù)指標:

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1) 氧氣分析測量:氧氣測量范圍0100%,分辨率0.0001%,精確度優(yōu)于0.1%,響應(yīng)時間小于7秒,24小時漂移低于0.01%,20分鐘噪音低于0.002pk-pk;溫度、壓力補償,4通道模擬輸出,16bit分辨率;數(shù)碼過濾(噪音)0-50秒可調(diào),增幅0.2秒,內(nèi)置A/D轉(zhuǎn)換器分辨率24 bits;可同時測量溫度(測量范圍0-60℃,分辨率0.001℃)和氣壓(測量范圍30-110kPa,分辨率0.0001kPa);具兩行文字數(shù)字LCD顯示屏,具背光,可同時顯示氧氣含量和氣壓;大小33x25x10cm,重量約4.5kg。另有雙通道高精度氧氣分析測量儀備選。

2) 高精度差分氧氣分析儀(備選),適于果蠅等微小昆蟲的開放式在線呼吸代謝測量,測量范圍0100%,精度0.1%,分辨率0.0001%

3) 二氧化碳分析測量(CA-10):雙波長非色散紅外技術(shù),測量范圍05%或010%兩級選擇(雙程),內(nèi)置數(shù)據(jù)采集系統(tǒng),實時測量,響應(yīng)時間小于1秒,分辨率優(yōu)于0.0001%1ppm(可達0.1ppm),精確度1%,建議氣流52000ml/分鐘,噪音小于2ppm24小時漂移低于0.002%,通過軟件溫度補償,采樣頻率10Hz;具兩行文字數(shù)字LCD顯示屏,具背光,可同時顯示CO2含量和氣壓;4通道模擬輸出,16bit分辨率,具數(shù)碼過濾(噪音);大小33x25x10cm,重量約4.5kg

4) 超高精度二氧化碳分析測量(備選):差分非色散紅外氣體分析儀,用于在線測量果蠅等微小生物或蜱螨類微小動物的能量代謝,測量范圍03000ppm,分辨率達0.01ppm,精確度1%

5) RH300水氣測量儀(備選):測量范圍0.2%-100%(相對濕度)、分辨率0.001%(相對濕度),露點溫度-40~40℃、分辨率0.002℃(露點溫度),水汽密度0-10µg/ml、分辨率0.0001µg/ml,水汽壓力0-20kPa、分辨率0.01Pa;模擬輸出16 bits,建議氣流速度5-2000ml/min,具兩行文字數(shù)字LCD顯示屏,具背光,可同時顯示水汽含量和溫度

6) SS4氣體二次抽樣單元:包括一個泵、針閥(控制進出泵體的氣流)和氣流計(02000ml/m);隔膜泵,滾軸馬達,最大流速2-4L/min;熱橋式氣流計,分辨率1ml/min,精確度2%;模擬輸出12 bits;重量約2kg

7) 氣路轉(zhuǎn)換器:8通道(包括一個Baseline通道),采樣頻率10Hz

8) UI-3數(shù)據(jù)采集器,12通道,8個模擬輸入,16bit分辨率;4個溫度輸入,分辨率0.001攝氏度;8個數(shù)字輸出用于系統(tǒng)控制,116bit計數(shù)器,2通道電壓輸出,脈沖寬度調(diào)制

9) 昆蟲玻璃氣室:超低二氧化碳和水氣吸收或通透性, 直徑33mm,標配包括50mm、100mm兩種長度(可選配其它長度),氣路接口OD3.2mm,特殊設(shè)計的雙通(兩端開通)密封蓋和擋板裝置,以使氣流均勻分布

10) 微型呼吸室:呼吸室及密封蓋均為硼硅玻璃材質(zhì),用于果蠅等微小昆蟲及昆蟲卵等的呼吸測量,直徑9.0mm,體積0.51.0ml,氣路接口OD1.5mm,硼硅玻璃密封蓋

11) 紅外活動監(jiān)測(可選配):紅外發(fā)射與檢測技術(shù),900nm近紅外光,不會被昆蟲察覺而造成干擾,也不會產(chǎn)生明顯的熱效應(yīng),用于監(jiān)測0.0005-1g的各種昆蟲、蜱螨等無脊椎動物的活動狀態(tài),以研究昆蟲等動物的生理生態(tài)、昆蟲活動與溫度的關(guān)系、昆蟲活動與呼吸代謝的關(guān)系、昆蟲健康狀況及生理狀態(tài)、殺蟲劑對昆蟲的影響及最小致死量、臨界熱極值CTmax(critical thermal maximum)、不連續(xù)氣體交換DGC(discontinuous gas exchange cycle)等。

12) Maven高通量昆蟲能量代謝測量模塊該模塊可同時測量16通道的昆蟲呼吸室,高度集成性,涵蓋呼吸室、RM8、Model840、MFC-2及數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)UI-3ExpeData軟件

 

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13) 專業(yè)技術(shù)配置與培訓(xùn),包括封閉式、開放式、抽氣式、推氣式、抽樣流動注射法等不同技術(shù)裝配與操作技術(shù)培訓(xùn)。

應(yīng)用案例:

 2021年底,美國斯克利普斯研究所Tomchik教授團隊在《Nature Communications》發(fā)表了關(guān)于神經(jīng)纖維瘤蛋白通過神經(jīng)元機制調(diào)控果蠅代謝Neurofibromin regulates metabolic rate via neuronal mechanisms in Drosophila"的論文。研究采用果蠅睡眠和活動代謝監(jiān)測系統(tǒng)(SSI果蠅能量代謝系統(tǒng))監(jiān)測果蠅的代謝率和活動來研究Nf1突變?nèi)绾螌?dǎo)致果蠅的多動癥、神經(jīng)元回路功能障礙和代謝改變(參見下圖)。

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原文Fig3. 晝夜光周期中Nf1的損失增加了代謝率。a:果蠅呼吸代謝監(jiān)測系統(tǒng)示意圖;bcNf1P1突變體和wCS10對照組的CO2產(chǎn)量(排放率);deNf1P1突變體和wCS10對照組的耗氧率;fNf1P1突變體和wCS10對照組的呼吸商;ghNf1 RNAi與雜合對照品系的CO2產(chǎn)量;IJNf1 RNAi與雜合對照品系的耗氧率;k. Nf1 RNAi與雜合性對品系呼吸商。

 

     為了深入了解代謝表型的晝夜參數(shù)和機制基礎(chǔ),通過SSI果蠅能量代謝系統(tǒng)測量氧氣消耗(VO2)和二氧化碳產(chǎn)量(VCO2), 24小時光周期Nf1P1突變體的VCO2VO2均高于對照組(Fig3b,d, Nf1P1突變體日間和夜間的總代謝率均高于對照組(Fig3c,e)。同樣,當使用nSyb-Gal4敲掉Nf1泛神經(jīng)元時,發(fā)現(xiàn)VCO2VO2均高于對照組(Fig3g-j),而且呼吸商(RQ)均顯著下降(Fig3f,k)。RQ降低與內(nèi)源性脂肪儲備利用率增加一致,表明Nf1的喪失可能會增加脂肪利用率??傮w而言,這些數(shù)據(jù)為Nf1在代謝調(diào)節(jié)中的作用提供了獨立的支持,表明它在24小時光周期內(nèi)是一致的,并表明它可能是由脂肪穩(wěn)態(tài)改變引起的。

北京易科泰生態(tài)技術(shù)有限公司與美國Sable等國際能量代謝測量技術(shù)公司合作,為國內(nèi)生物學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、運動醫(yī)學(xué)、環(huán)境醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)研究提供全面能量代謝研究技術(shù)方案和能量代謝實驗室方案:

SSI大鼠、小鼠等實驗動物能量代謝測量技術(shù)

畜禽能量代謝測量技術(shù)

斑馬魚能量代謝測量技術(shù)

人體能量代謝測量技術(shù)

Foxbox超便攜能量代謝測量技術(shù)

動物活動與生理指標(體溫、心率等)監(jiān)測技術(shù)

測量參數(shù)包括:氧氣消耗量(VO2)、二氧化碳產(chǎn)量(VCO2)、呼吸商(RQ)、能耗(EE,包括REE、AEE、TEE等)、熱傳導(dǎo)速率(Ct)、日代謝率(DEE)、最大代謝率(MRmax)、呼吸水分喪失(EWL)、能耗效率、EWL/RMR(表示肺的氧氣攝取能力)、定制行為學(xué)模塊參數(shù)等。

 

參考文獻

1.Bethany A Stahl, PhD, Melissa E Slocumb, BS, Hersh Chaitin, MS, Justin R DiAngelo, PhD, Alex C Keene, PhD, Sleep-Dependent Modulation of Metabolic Rate in DrosophilaSleep, Volume 40, Issue 8, August 2017, zsx084

2.Botero V, Stanhope BA, Brown EB, Grenci EC, Boto T, Park SJ, King LB, Murphy KR, Colodner KJ, Walker JA, Keene AC, Ja WW, Tomchik SM. Neurofibromin regulates metabolic rate via neuronal mechanisms in Drosophila. Nat Commun. 2021

3.Elizabeth B.Brown, Jaco Klok, Alex C.Keene. Measuring metabolic rate in single flyies during sleep and waking states via indirect calorimetry. Journal of Neuroscience Methods, 2022

4.Santoro, C., O’Toole, A., Finsel, P. et al. Reducing ether lipids improves Drosophila overnutrition-associated pathophysiology phenotypes via a switch from lipid storage to beta-oxidation. Sci Rep 12, 13021 (2022). 


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